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干扰素含量测定(MTT法生物学活性测定)

干扰素(IFN)可分为IFN-αIFN-βIFN-γ等几种,它们在机体免疫调节、抗病毒、抗肿瘤中具有重要作用。

干扰素能刺激某些指示细胞(如人羊膜上皮细胞Wish株、人喉癌细胞株Hep-2、人胚肌皮、肺单层细胞等)产生抗病毒蛋白,从而使细胞免受水疱性口炎病毒(VSV)的攻击,根据待测样品不同稀释度的保护能力,计算出干扰素生物学活性单位。

【材料】 VSVWish细胞、MTT、二甲亚砜(DMSO)10FCS RPMI1640、培养板、培养瓶、CO2孵箱、超净台、酶标检测仪。

【方法】

【结果】
  以保护半数(50)细胞免受病毒损害的最高干扰素稀释度为1个干扰素活性单位。也可从标准曲线中求得待测样品的IFN活性单位。
【注意事项】
  1、实验时先加IFN,后加指示细胞,以使细胞均匀分布于培养板底部。
  2、本法对天然培养上清或重组IFN-αIFN-βIFN-γ均可检测其活性单位。