外泌体提取试剂盒

1. 超速离心法是最常用的外泌体纯化手段，目前已发表文献引用最多的方法，采用低速离心、高速离心交替进行，可分离到大小相近的囊泡颗粒。

优点：无需特殊试剂，操作简便，适合大批量样本。

缺点：耗时耗力，纯度相对较低，回收率不稳定，重复离心会一定程度损伤外泌体，设备要求高。

2. 密度梯度超速离心法是在超速离心力作用下，使蔗糖溶液形成从低到高连续分布的密度阶层，是一种区带分离法。通过密度梯度离心，样品中的外泌体将在1.13-1.19g/mL的密度范围富集。

优点：纯度相对较高，适合大批量样本。

缺点：步骤繁琐，耗时，回收率不稳定，重复离心会一定程度损伤外泌体，设备要求高。

3. 超滤法是将溶剂及小分子物质过滤到膜的另一侧，而将相对大分子物质截留在超滤膜上，以达到分离的目的。

优点：简单高效，不影响外泌体的完整性。

缺点：外泌体可能会阻塞过滤孔，导致膜的寿命减短，分离效率和纯度较低。此外，截留在膜上的外泌体间也会发生粘附，导致产量降低。

4. 多聚物沉淀法根据化合物与外泌体的理化特性，利用共沉淀或者反向筛选的方式对外泌体进行分离纯化。

优点：操作简单、耗时短、无设备限制。

缺点：纯度较低，存在假阳性（杂蛋白较多或一些难以去除的聚合物），机械力或化学添加物对外泌体产生破坏，存在于分离物中的聚合物也可能会干扰下游分析等。

5. 抗体亲和（磁珠）法利用包被单克隆抗体的磁珠结合外泌体，外泌体表面有其特异性标记物（如CD63、CD9蛋白），用包被抗标记物抗体的磁珠与外泌体囊泡孵育后结合，即可将外泌体吸附并分离出来。

优点：纯度较高，特异性和重复性好、操作简便、无设备限制。

缺点：效率和回收率较低，仅能捕获表达特定抗原的目标外泌体，外泌体生物活性易受pH和盐浓度影响，囊泡完整性影响较大。